Пцр гепатита с количественный норма





База знаний: HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]

HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]

Исследование для выявления возбудителя гепатита C (HCV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (РНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

РНК HCV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HCV, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5×10 2 – 1,0×10 8 копий/мл образца .

Вирус гепатита С (ВГС), количественное определение РНК.

Hepatitis C Virus RNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood, HCV Viral Load, Hepatitis C Virus RNA Quant.

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (HCV) – РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает печень. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Основной путь передачи инфекции – через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятно заражение при половом контакте и ребенка от матери во время родов, но это случается нечасто.

Острый вирусный гепатит, как правило, характеризуется бессимптомным течением и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро – с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса (редко сопровождается желтухой). У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Хронический вирусный гепатит С протекает с повышением печеночных ферментов и скудным проявлением симптомов. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Выявление РНК HCV свидетельствует о размножении вируса в организме и является методом диагностики заболевания. Генетический материал вируса можно обнаружить с помощью ПЦР через 10-12 дней после инфицирования – в этот период специфические антитела, которые образуются через несколько месяцев после заражения, отсутствуют и биохимические показатели функции печени находятся в пределах референсных значений.

Посредством ПЦР выявляют РНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV позволяет контролировать проводимую терапию и прогнозировать течение болезни.

Эффективность лечения оценивается по количеству РНК до и во время терапии. Обычно вирусная нагрузка крови снижается в несколько раз за первые три месяца успешного лечения. При эффективной терапии виремия уменьшается на два порядка в первые 4-12 недель лечения и после окончания курса терапии генетический материал вируса в крови не обнаруживается. Отсутствие снижения виремии через 12 недель с начала лечения указывает на его неэффективность. Рекомендовано проводить анализ до начала терапии, на 4-й, 12-й и 24-й неделях лечения и через 24 недели после окончания курса. Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени.

Для чего используется исследование?

  • Для подтверждения диагноза «вирусный гепатит С».
  • Для прогнозирования течения вирусного гепатита С.
  • Для мониторинга противовирусной терапии и решения вопроса о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

  • При качественном обнаружении РНК вируса гепатита С.
  • При остром и хроническом вирусном гепатите С.
  • При микст-гепатитах.
  • При планировании, во время и после окончания противовирусной терапии.

Что означают результаты?

  • Не обнаружено – РНК вируса гепатита С не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (200 копий/мл = 40 МЕ/мл).
  • копий/мл ( МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена. Низкая виремия (наиболее благоприятный прогноз течения заболевания и эффективности терапии).
  • 2*10^6 копий/мл ( 8*10^5 МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена. Высокая виремия.
  • 1,0*10^8 копий/мл ( 2,4*10^7 МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.

Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5*10^2 – 1,0*10^8 копий/мл (1,8*10^2 – 2,4*10^7 МЕ/мл).

Что может влиять на результат?

Недостоверный результат может быть получен при:

  • загрязнении биоматериала;
  • наличии в образце ингибиторов – химических и белковых субстанций, влияющих на различные компоненты ПЦР;
  • присутствии в крови гепарина.
  • Уровень вирусной нагрузки крови не указывает на степень повреждения печени и тяжесть заболевания. Для их оценки необходимо исследовать биохимические показатели и материалы биопсии.
  • При планировании лечения очень важно определить генотип вируса гепатита С.

Кто назначает исследование?

  • Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. - К. Здоровье, 2000. – Т.1. 600-690.
  • Кишкун А.А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. - М.:ООО МИА, 2006. – 471-476 с.
  • Harrison's Principles of Internal Medicine. 16 th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F, and others. In vivo tropism of hepatitis C virus genomic sequences in hematopoietic cells: influence of viral load, viral genotype, and cell phenotype. Blood. 1998 May 15;91(10):3841-9.PMID:9573022.
  • Revie D, Salahuddin SZ. Human cell types important for hepatitis C virus replication in vivo and in vitro: old assertions and current evidence. Virol J. Jul 11;8:346. doi: 10.1186/1743-422X-8-346. PMID:21745397.

Пцр количественный гепатит с норма

Гепатит С является одним из самых распространенных заболеваний печени, которое возникает при инфицировании вирусом гепатита С HСVпроникающим в организм преимущественно при контакте с кровью инфицированного человека. Встречается хронический и острый гепатит У 70-80 процентов пациентов с острым гепатитом С нет никаких симптомов заболевания, только в некоторых случаях через какое-то время после заражения бывают проявления болезни, которые выражаются в усталости, боли в животе, потере аппетита, потемнении мочи, рвоте, тошноте, осветлении кала, желтухе, боли в суставах. Как правило, симптомы возникают спустя 6-7 недель после заражения, но срок появления признаков заболевания варьируется от 2 недель до полугода. При возникновении вышеперечисленных симптомов нужно обратиться к врачу-инфекционисту и сдать анализ крови на гепатит Диагностика гепатита, проведенная своевременно, позволяет обнаружить заболевание еще на ранних стадиях и существенно увеличить шансы на выздоровление. Когда назначается анализ на гепатит С Ситуации, когда обязательно назначается анализ на гепатит С: во время вынашивания беременности и при планировании семьи; пациентам с симптомами хронического или острого гепатита; человек находится в группе риска. Это медицинские работники, лица, пребывающие в местах лишения свободы, сотрудники правоохранительных органов, лица, которые употребляют наркотики, имеют большое число половых партнеров, страдают СПИДом, находятся на гемодиализе и прочие. Подготовка к анализу на гепатит С Специальной подготовки к анализу на гепатит С не требуется. Для анализа производится забор крови из вены натощак, при этом после последнего приема пищи должно пройти не менее восьми часов. Анализы ИФА на гепатит С Первый анализ, обычно назначаемый для диагностики гепатита С — ИФА тест иммуноферментный анализ. Анализы ИФА на гепатит С позволяют обнаружить в крови наличие антител к вирусу гепатита С anti-HCVAb. Если результат ИФА теста положительный, то это указывает на наличие контакта организма с вирусом гепатита Но у 40 процентов людей, у которых положительный ИФА, в крови тест вируса не обнаруживается. Это явление называется ложноположительным результатом. Также при помощи ИФА проверятся донорская кровь. Анализы RIBA на гепатит С Анализ RIBA на гепатит С используется для подтверждения положительного результата ИФА. Метод рекомбинантного иммуноблотинга RIBA является более точным исследованием наличия антител к вирусу гепатита С. Наличие в организме вируса гепатита С положительный результат этого анализа также не определяет, а только подтверждает присутствие антител. Анализы ПЦР на гепатит С С целью выявить наличие в крови вирусов гепатита С RNA HCV и поставить диагноз, чаще всего пользуются анализом методом полимеразной цепной реакции ПЦР. Это исследование дает возможность обнаружить с высокой точностью присутствие в крови даже малого количества вируса. Анализ ПЦР на гепатит С может выявить наличие вируса уже спустя 5 дней после заражения, задолго до возникновения антител. Когда результат анализа ПЦР положительный, то это означает наличие активной инфекции. Существуют такие вариации анализа ПЦР: количественный ПЦР, позволяющий определить не только сам факт наличия вируса, но и вирусную нагрузку количество вируса. Этот показатель имеет большое значение для определения эффективности лечения; генотипирование, устанавливающее генотип вируса гепатита С, что важно для определения продолжительности и тактики лечения. Количественный анализ ПЦР проводится: при качественном положительном тесте на присутствие в сыворотке РНК вируса гепатита С; для точной оценки эффективности лечения; для определения тактики лечения пациента. Прямой взаимосвязи между тяжестью гепатита С и количеством вируса в крови не существует. Концентрация вируса влияет на инфекционность заболевания, то есть, чем больше количество вируса в крови больного, тем больше риск передачи вируса, к примеру, при половом контакте или от матери ребенку. Также от концентрации вируса зависит эффективность лечения. При проведении терапии благоприятным фактором является низкая вирусная нагрузка, а очень высокая — неблагоприятным. Анализ генотипирования делается: при качественном положительном тесте на присутствие в сыворотке РНК вируса гепатита С; для точной оценки эффективности лечения; для определения тактики лечения пациента; для прогнозирования хронизации инфекционного процесса; для определения прогрессирования заболевания. Выявление генотипа вируса имеет большое значение для определения продолжительности лечения, что важно, поскольку интерферону присущи широкий спектр побочных действий и низкую переносимость больными. Расшифровка анализа на гепатит С В норме РНК вируса, антитела к ним и антигены полностью отсутствуют. Присутствие антител в крови свидетельствует о наличии хронического или острого гепатита С либо о периоде выздоровления. Если в крови присутствует RNA HCV, который определяется при анализе ПЦР, это указывает на наличие в крови вируса. При неправильной технике проведения исследования, нарушениях транспортировки и забора крови анализ ПЦР иногда может показывать ложноположительные результат. Анализы ИФА и RIBA на ранних стадиях заболевания, когда организмом еще не выработано достаточное количество антител, могут показывать ложноотрицательный результат. Если при расшифровке анализа на гепатит С получены положительные результаты, необходимо обращение к врачу-инфекционисту и гастроэнтерологу для дальнейшей диагностики и лечения.

Другие статьи на тему:

Copyright © 2006-
rthl.ru

Расшифровка анализов при подозрении на гепатит B и гепатит D

Определение

  • Возбудителем заболевания является ДНК вирус гепатита В (HBV-DNA)
  • Примерно 40% населения земли имеют антитела к HB-core антигену вируса гепатита В (anti-HBc) как показатель перенесенного или активного гепатита В.
  • Смертность в результате осложнений гепатита В составляет 1 мил. случаев в год.
  • Заражение происходит через укол медицинской иглы (вероятность заражения около 30%), нанесение раны зараженными медицинскими инструментами, при переливании крови, а также через сексуальный контакт (65%), от матери ребенку при внутриутробном заражении и т.д..
  • Инкубационный период 30-180 дней.
  • Течение гепатита В
    • Острый гепатит с жалобами наблюдается у 35% пациентов, без жалоб у 65% пациентов.
    • Самоизлечения отмечается у 99% пациентов. У 6 месяцев.
      HBsAg - отрицательный и anti-HBc-общий - не обнаружено расшифровать в таблице нельзя (см. в таблице расшифровка скрининга выше).

    Когда нужно лечить гепатит В (показания)?

    Показания основаны на рекомендациях S3-Guideline . Данная рекомендация является информационной и может отличаться от таковой в вашем регионе. Поэтому, консультация врача специалиста является обязательной для определения точных показаний для лечения гепатита В.

    Острый гепатита В
    • Противовирусное лечение острого гепатита В не показано у взрослых ввиду высокой частоты самоизлечения (наблюдается у 99-100% пациентов).
    • Лечение показано у пациентов с тяжелым течением острого гепатита В (фульминантный гепатит).
    • При обнаружении протромбинового времени по Квику 6 месяцев. Для оценки показаний лечения хронического гепатита В необходимо иметь результаты следующих анализов:
      1) биопсия печени для оценки степени воспалительного процесса и диагностики цирроза/фиброза печени;
      2) количественное определение ДНК вируса методом ПЦР;
      3) определения уровня АлАТ;
      Расшифровку далее см. в таблице.

    Контрольное обследование при гепатите В?

    Острый гепатита В
    • Контроль печеночных проб (АлАТ и АсАТ) и протромбинового времени по Квику до полной нормализации.
    • Контроль HBsAg и anti-HBs каждые 3-12 месяцев до полной сероконверсии. Сероконверсия - это момент, когда HBsAg будет отрицательным при параллельном anti-HBs 10 мЕд/мл (диагностируется только лабораторно).
    • Необходимо определение ДНК вируса методом ПЦР, если через 12 месяцев anti-HBs будет все еще 6 месяцев.

Основная литература: Cornberg M et al. Aktualisierung der S3-Leitlinie zur Prophylaxe,Diagnostik und Therapie der Hepatitis-B-Virusinfektion. AWMF-Register-Nr. 021/011. The German Guideline

Источники: http://www.helix.ru/kb/item/542, http://rthl.ru/content/ptsr-kolichestvenniy-gepatit-s-norma.html, http://www.kliniklab.com/html/gastro-entero/hepatitis-b-interpet.html








Комментариев пока нет!

Поделитесь своим мнением